人柠檬酸合酶 - 线粒体检测试剂盒(CS)

双抗体夹心法的实验步骤:
首先,它是实验前的准备工作。
实验材料:血清,血浆,体液
实验设备:标准酶比色计,96孔板,移液枪,离心管,离心机箱
必要的试剂和试剂盒:碳酸盐涂层缓冲液,抗体球蛋白,吐温-20,柠檬酸,硫酸
第二是实验操作。
包被的抗体:用包被缓冲液将特异性抗体球蛋白稀释至合适的浓度(1-10μg/ ml),每孔加入0。
3毫升,在4℃下过夜或在37℃的水浴中3小时
洗涤:去除涂层溶液并使用洗涤缓冲液(包括0)。
05%Tween-20)每次洗涤3次,每次5分钟
每孔加0。
将2ml含有抗原的样品在稀释缓冲液中在37℃下稀释1至2小时
请加0。
将2ml酶特异性抗体溶液稀释在稀释缓冲液中,在37℃下孵育1-2小时,或通过先前的测试确定。
请加0。
在室温下将2ml底物溶液施加到每个孔(OPD或OT)30分钟(另外的空白对照,0)。
4毫升底物+0。
1毫升终止剂)
添加终止剂:每孔加入2 M H 2 SO 4或2 M柠檬酸。
05毫升
观察结果:使用视觉或基于酶的比色计(OPD在492nm)通过ELISA进行OD值
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